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人甘胆酸ELISA检测试剂盒免疫分析

上海抚生实业有限公司2014年7月10日 15:29 点击:730

试验原理

CG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA.已知CG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将CG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物AB,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中CG的浓度呈比例关系。

 

试剂盒内容及其配制

试剂盒成份(2-8℃保存)

96孔配置

48孔配置

配制

96/48人份酶标板

1块板(96T

半块板(48T

即用型

塑料膜板盖

1

半块

即用型

标准品:8.0mg/L

1瓶(0.6ml

1瓶(0.3ml

按说明书进行稀稀

空白对照

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

即用型

标准品稀释缓冲液

1瓶(5ml

1瓶(2.5ml

即用型

生物素标记的抗CG抗体

1瓶(6ml

1瓶(3.0ml

即用型

亲和链酶素-HRP

1瓶(10ml

1瓶(5.0ml

即用型

洗涤缓冲液

1瓶(20ml

1瓶(10ml

按说明书进行稀释

底物A

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

即用型

底物B

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

即用型

终止液

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

即用型

标本稀释液

1瓶(12ml

1瓶(6.0ml

即用型

 

自备材料

1. 蒸馏水。

2. 加样器:5ul10ul50ul100ul200ul500ul1000ul

3. 振荡器及磁力搅拌器等。

 

安全性

1. 避免直接接触终止液和底物AB。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

 

操作注意事项

1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器。

5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

 

样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液

5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

(来源: 上海抚生实业有限公司


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