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百萤教您选择正确的ROS探针(一)

西安百萤生物科技有限公司2019年5月5日 1:33 点击:463

百萤教您选择正确的ROS探针,正确的选择让实验不再迷茫。活性氧(ROS)是化学反应性的含氧化学物质,其作为细胞代谢的副产物而产生。 在动物细胞中,ROS的产生通常发生在线粒体中。 在植物细胞中,ROS也可以在叶绿体中产生。 最近,已显示ROS在过氧化物酶体和各种细胞类型的质膜氧化酶中产生。

figure-31-ros-reaction.jpg

当过量产生时,ROS一直被认为会导致细胞大分子如DNA,脂质和蛋白质的损伤。 从整体上讲,这是由细胞的氧化应激状态表示的。 这种应激状态与细胞过程如细胞凋亡有关,而且在宏观上更像是在许多人类疾病的发病机制中发挥作用。

由于其具有破坏性的影响,细胞有几个精心调节的系统来管理过量的ROS。 最充分研究的系统是谷胱甘肽 - 抗坏血酸循环,其使用NADH和NADPH作为电子供体将H2O2解毒为H2O。 其他系统包括酶,例如超氧化物歧化酶,其催化超氧阴离子(O 2- )歧化成O 2H 2 O 2,和过氧化氢酶,其催化H 2 O 2分解成H 2 O和O 2

ROS对细胞的利与弊导致它们早已被广泛的研究了,但是最近研究已经研究了ROS在细胞信号传导中的作用。 在控制量方面,ROS已被证明可调节基因活化。 然而,出现这种情况的具体机制仍有争议。ROS可能与特殊受体结合,这些受体启动信号级联,导致基因调控。 ROS也可能通过调节蛋白质磷酸化直接修饰这种信号级联中的蛋白质。

既然ROS对细胞作用如此之大且类型繁多,那么如何才能正确的选择探针对ROS进行检测呢?

检测目标

作用目标

探针

货号

原理


过氧化氢(H2O2

许多酶促ROS清除途径的产物。 最充分研究的是超氧化物歧化酶活性,其催化超氧阴离子还原为过氧化氢。

活细胞

DCFH-DA

15204

探针进入细胞,其中酯酶裂解双乙酸酯基团。 然后DCFH被过氧化氢氧化成DCF并在激发时发出绿色荧光。


二氢罗丹明123

15206/15207

探针被动地渗透细胞膜。 通过过氧化氢氧化产生罗丹明123,其在激发时发出蓝色荧光。


OxiVision? Blue

11504/11505

探针渗透细胞并被细胞内过氧化氢氧化,激发时产生荧光


OxiVision? Green

11503/11506


细胞提取物

Amplite?荧光过氧化氢检测试剂盒(红色)

11501

过氧化氢依赖氧化ADHP(同义词:10-乙酰基-3,7-二羟基吩恶嗪,Amplex?Red)通过辣根过氧化物酶(HRP)将ADHP转化为试卤灵。 可以使用比色法或荧光法检测试卤灵。


Amplite?比色过氧化氢检测试剂盒

11500


Amplex?红色过氧化氢/过氧化物酶检测试剂盒

/

辣根过氧化物酶(HRP)对过氧化氢IR的过氧化氢依赖性氧化产生活化的探针。 激发会发出近红外荧光信号


Amplite?荧光过氧化氢检测试剂盒(红外光)

11502


检测目标

作用目标

探针

货号

原理

超氧阴离子(O2-)

有氧代谢的副产物,如线粒体呼吸(特别是复合物I和复合物III)

活细胞/细胞提取物

lucigenin(光泽精)

21259

通过转化为光泽精阳离子基团激活光泽精。 光泽精阳离子自由基与超氧阴离子反应生成二氧杂环丁烷中间体,其分解为N-甲基吖啶酮。 N-甲基吖啶酮中的高能电子降低能量状态,导致发光。

Coelenterazine(腔肠素)

21150

超氧阴离子的氧化导致激发的电子态。 在衰变到基态电子配置时,光子作为发光释放。

Luminol(鲁米诺)

11050

超氧化物依赖性酶催化鲁米诺的氧化导致发光。

Hydroethidine(二氢乙锭)

15200

探针被动地渗透完整细胞并定位于线粒体中。 通过超氧化物氧化激活探针。 活化的探针与DNA嵌入,并在激发后发荧光。 DNA结合是强荧光信号所必需的。 对于氢化乙啶,活化的探针是乙锭(即与DNA染色溴化乙锭相同的活性物质)

MitoSox? Red

/

MitoROS? 580

16052/22970/22971

MitoROS? 520

16060

探针容易通过完整的细胞膜,然后定位在线粒体中。 然后通过超氧化物氧化。 激发后,它会释放出绿色荧光

检测目标

作用目标

探针

货号

原理

羟基(?OH)

当超氧阴离子与过渡金属反应时可以产生。 极度反应。 可以与DNA骨架上的氢反应,导致链断裂。

活细胞/细胞提取物

MitoROS? OH580

16055

探针能够自由地进入活细胞,其中活细胞被游离羟基特异性氧化。 激发后,氧化的探针发出红色荧光。

总ROS

包括过氧化氢,超氧阴离子,羟基自由基,单线态氧,一氧化氮,过氧化丁基和次氯酸

活细胞/细胞提取物

ROS? Brite 570

16000/22902

探针被动地渗透完整的细胞膜。 一旦进入细胞内,探针就被细胞内的ROS氧化。 探针也可以在溶液中被ROS氧化,用于细胞提取物测定。 激发后,探针发出荧光信号。

ROS? Brite 670

16002/22901

ROS? Brite 700

16004/22903

Amplite? ROS Green

22900

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(来源: 西安百萤生物科技有限公司


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