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百萤教您选择正确的ROS探针(二)

西安百萤生物科技有限公司2019年5月7日 1:16 点击:374

百萤教您选择正确的ROS探针,正确的选择让实验不再迷茫。活性氧(ROS)是化学反应性的含氧化学物质,其作为细胞代谢的副产物而产生。 在动物细胞中,ROS的产生通常发生在线粒体中。 在植物细胞中,ROS也可以在叶绿体中产生。 最近,已显示ROS在过氧化物酶体和各种细胞类型的质膜氧化酶中产生。

figure-31-ros-reaction.jpg

活性氧对细胞的危害

1 对核酸的氧化损伤

受到氧化损伤后的DNA可能会发生断裂、突变以及对热稳定性改变等,从而严重影响了遗传信息的正常转录、翻译过程。 

2 对蛋白质的氧化损伤

活性氧对蛋白质的作用包括修饰氨基酸,使肽链断裂,形成蛋白质的交联聚合物,改变构像和免疫原性等5个方面。

3 修饰氨基酸

4 使肽链断裂

5 形成蛋白质交联聚合物 

6 改变构像

7 改变免疫原性

8 损伤生物膜,导致细胞和机体的能量代谢障碍


检测目标

作用目标

探针

货号

原理


羟基(?OH)

当超氧阴离子与过渡金属反应时可以产生。极度反应。可以与DNA骨架上的氢反应,导致链断裂。

活细胞/细胞提取物

MitoROS?OH580

16055

探针能够自由地进入活细胞,其中活细胞被游离羟基特异性氧化。激发后,氧化的探针发出红色荧光


总ROS

包括过氧化氢,超氧阴离子,羟基自由基,单线态氧,一氧化氮,过氧化丁基和次氯酸

活细胞/ 细胞提取物

ROS?Brite 570

16000/22902

探针被动地渗透完整的细胞膜。一旦进入细胞内,探针就被细胞内的ROS氧化。探针也可以在溶液中被ROS氧化,用于细胞提取物测定。激发后,探针发出荧光信号


ROS?Brite 670

16002/22901


ROS?Brite 700

16004/22903


Amplite?ROS绿色

22900


检测目标

探针

货号

原理

SOD歧化酶(SOD)
催化超氧化物转化(即歧化)成氧和过氧化氢

Amplite?比色超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒

11305

首先使用黄嘌呤氧化酶(XO)将黄嘌呤转化为过氧化氢和尿酸,同时催化分子氧(O2)还原成超氧阴离子(O2-)。 然后使用ReadiView?SOD560对超氧化物歧化进行竞争性抑制,以量化超氧化物歧化酶活性。 ReadiView?SOD560吸光度的降低与SOD活性成正比。

过氧化氢酶
几乎无处不在的抗氧化酶,将过氧化氢转化为水和分子氧

Amplite?荧光过氧化氢酶检测试剂盒(红色)

11306

竞争性抑制试验。 Amplite?Red探针通过过氧化氢氧化活化。 因此,探针与过氧化氢酶竞争氢过氧化物酶底物。 Amplite Red吸光度与过氧化氢酶活性成反比。

谷胱甘肽(GSH)
非常重要的氧化还原化合物 它是谷胱甘肽 - 抗坏血酸循环的主要成分,可将过氧化氢转化为水

Thiolite?绿色

10056

在与谷胱甘肽反应后探针被激活。 激发后,探针释放绿色荧光。

Amplite?荧光谷胱甘肽GSH / GSSG比率分析试剂盒

10060

使用Thiolite?Green探针,在与谷胱甘肽(GSH)反应后激活,以定量谷胱甘肽。 氧化型谷胱甘肽(GSSG)通过测量酶催化还原GSSG至GSH之前和之后的GSH浓度来确定。 通过从总GSH中减去初始GSH(酶反应前)(酶反应后)来计算GSSG浓度。

谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)
催化GSH氧化成GSSG并将过氧化氢转化为水

Amplite?荧光谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(蓝色)

11560

酶循环测定。 谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)催化谷胱甘肽从GSH氧化成GSSG。 谷胱甘肽还原酶(GR)然后用辅酶NADPH催化GSSG还原成GSH,辅酶NADPH被氧化成NADP +。 然后,Quest Fluor?NADP探针量化NADP +的水平,其与原始GPx活性成正比。

抗坏血酸
也称为抗坏血酸或维生素C,它是谷胱甘肽 - 抗坏血酸循环的主要成分,可将过氧化氢转化为水

Amplite?荧光抗坏血酸检测试剂盒(蓝色)

13835

依赖于通过酶催化反应将抗坏血酸脱氢成脱氢抗坏血酸(DHA)。 得到的DHA由Ascorbrite Blue探针定量。

NAD+/ NADH
ATP合成中主要成分发生在线粒体中。 该辅酶被认为与超氧化物的产生有关,其产率取决于NAD + / NADH比率。

Amplite?NAD / NADH试剂盒

15273/15258/15275/15280/15263/15257/15261/15262/15291/15290/15259/15271

通常,使用NAD +特异性探针来量化NAD +浓度。 NAD + / NADH比率通过酶循环测定确定。

NADPH
在谷胱甘肽 - 抗坏血酸循环中充当电子供体,将过氧化氢转化为水

Amplite?NADPH试剂盒

15274/15272/15260/15276/15264/15262/15259/15291/15290

通常,使用NADPH特异性探针来量化NADPH浓度。 NADP / NADPH比率通过酶循环测定确定。

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(来源: 西安百萤生物科技有限公司


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