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百萤生物为您推荐优质的钙离子荧光探针之Cal-590

西安百萤生物科技有限公司2019年5月22日 11:30 点击:230

检测对于许多生物学研究至关重要。荧光探针显示结合钙的光谱响应,使研究人员能够通过荧光显微镜,流式细胞仪,荧光光谱和荧光酶标仪研究细胞内游离钙浓度的变化。Rhod-2 AM最常用于红色荧光钙指示剂之一。然而,Rhod-2 AM在酯酶水解后仅在活细胞中发生中度荧光,并且具有非常小的细胞钙反应

百萤生物AAT Bioquest中国代理商,为您提供Cal-590?很好的改善RHOD-2 AM细胞负载和钙反应,同时保持Rhod-2 AM的相似的光谱波长,使其与TRITC / Cy3?滤波器集合。在CHO和HEK细胞中,Cal-590 TM的细胞钙应比Rhod-2 AM敏感得多。Cal-590?的光谱与fitc、alexa fluor?488和gfp的光谱很好地分离,使其成为一种理想的钙离子探针,可与gfp细胞系或fitc/alexa fluor?488标记抗体复合进行细胞内分析。

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1. Cal-590 在氯化钙(5 mM)存在下的激发和发射光谱


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2. Cal-590?在含有0至39μM游离Ca 2+溶液中的荧光发射光谱

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3.在相同条件下用Cal-590 TM AM(红色曲线,Cat#)和Rhod-2,AM(蓝色曲线)孵育的CHO-K1细胞中内源性P2Y受体的ATP刺激的钙响应。将CHO-K1细胞在96孔黑壁/透明底板中以每100μL/孔50,000个细胞的细胞密度接种过夜。向细胞中加入100μL的5μg/ mL Cal-590 TM AM或具有2.5mM丙磺舒的Rhod-2AM,并将细胞在37℃下孵育1小时。ATP(50μL/孔)通过FlexStation?加入(Molecular Devices)中,以达到最终的指定浓度。


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 4.CHO-K1细胞中内源性P2Y受体对ATP的反应。在Costar 96孔黑壁/透明底板中以每孔100μL40,000个细胞接种CHO-K1细胞过夜。100微升的4μM的校准- 590?AM(货号:)在HHBS用1mM丙磺舒加入到孔中,并且将细胞在37℃下温育2小时。将染料上样培养基替换为100μLHHBS和1mM丙磺舒,然后在添加50μL300μMATP之前和之后使用TRITC通道用荧光显微镜(Olympus IX71)成像。


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(来源: 西安百萤生物科技有限公司


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