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鲎试剂分类及选购-内毒素检测新手必看

厦门市鲎试剂实验厂有限公司2008年8月29日 15:12 点击:4166

显色基质鲎试剂、凝胶法鲎试剂、特异性鲎试剂、动态浊度法鲎试剂、比色法鲎试剂、显色法鲎试剂、动态显色法鲎试剂、浊度法鲎试剂 、动态比浊法鲎试剂、弃G因子鲎试剂、终点显色法鲎试剂...

 

如果你是一位刚准备做细菌内毒素检测的实验人员,看到有这么多种鲎试剂,是不是有个疑问:“这么多种鲎试剂,我该怎么选择呢?”

别急,不要被这么多名字吓到了,以下为您详细分类介绍;

首先,知道什么是鲎试剂。鲎试剂是从栖生于海洋的节肢动物“鲎”的兰色血液中提取变形细胞溶解物,经低温冷冻干燥而成的生物试剂,专用于细菌内毒素检测。

 

按原料来源分:

全世界有5个种属的鲎,其中仅有中国鲎(又名三刺鲎)Tachypleus tridentatus Leach和美洲鲎

 Limulus polyphemus Linnaeus可制造鲎试剂,对应生产出来的鲎试剂分别为中国鲎鲎试剂

Tachypleus Amebocyte Lysate),缩写为TAL;美洲鲎鲎试剂(Limulus Amebocyte Lysate),

缩写为LALTALLAL有相同的功效。

 

按方法分:

中国药典2005年版中收录了2种细菌内毒素检查法,即凝胶法和光度测定法,后者包括浊度法和

显色基质法。供试品检测时,可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时,除另有

规定外,以凝胶法结果为准。

05年中国药典附录细菌内毒素检查法详见

 

凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素的方法。凝胶法鲎试剂常见规格为0.1ml/支或0.5ml/支或者更大装量,使用时应加无热原水(细菌内毒素检查用水)复溶后使用。2005年版药典中凝胶法鲎试剂结果的判断:保温60分钟±2分钟后观察结果。部分商家所说的半小时出结果的快速凝胶法鲎试剂是没有依据的,没到时间就观察结果可能导致假阴性。特异性鲎试剂(又叫弃G因子鲎试剂)是凝胶法鲎试剂的一种,细菌内毒素及β-葡聚糖均能与鲎试剂发生凝聚反应。特异性鲎试剂就是屏蔽β-葡聚糖引起的鲎试剂凝聚反应,使鲎试剂仅与内毒素起反应。一般中草药注射液成份复杂,干扰因素较多,常含有β-葡聚糖或内毒素类似物。用特异性鲎试剂能减少或消除假阳性反应。(应做对比及干扰试验)。

 

光度测定法分为浊度法和显色基质法,这2种方法都是定量检测内毒素的。

浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。根据检测原理,可分为终点浊度法和动态浊度法。终点浊度法未见与商品化产品,不再赘述。动态浊度(比浊)法是检测反应混合物的浊度到达某一预先设定的吸光度所需要的反应时间,或是检测浊度增加速度的方法。

 

显色基质法系利用鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物显色释放出的呈色团的多少而测定内毒素含量的方法,因使用分光光度计或酶标仪器,又称为比色法。根据检测原理,分为终点显色法和动态显色法。国内已有显色基质鲎试剂盒(终点法),早期有上海伊华以鲎三肽为原料做成的鲎试剂盒,厦门鲎试剂厂于2005推出以鲎四肽为原料的鲎试剂盒,也有少量国外产品,但到货周期长,价格远高于国产试剂。动态比色法与终点比色基本原理差不多。国产暂无动态比色法,相信很快就会面市。

 

如果您是药厂、医院、医疗器械厂商等单位的实验人员,仅需要检测样品的内毒素限量,则应选择凝胶法鲎试剂,通过确定内毒素限值及最大有效稀释倍数,做样品的干扰试验从而确定使用的鲎试剂的灵敏度。

如果您需要定量测定样品中内毒素含量则应选择显色基质鲎试剂或动态浊度法鲎试剂。

动态浊度法鲎试剂一般需要配备专用的动态浊度仪或带有特定软件的酶标仪,比较适合样品量较多的用户(。显色基质鲎试剂用酶标仪或分光光度计检测。是样品数较少(少于200-300个),设备比较简陋的用户。如果已有内毒素检测专用酶标仪,则可选择显色基质鲎试剂盒或动态浊度法鲎试剂。

简单的说鲎试剂就2种:定性和定量,定性就选凝胶法(特殊产品用特异性鲎试剂)。定量就是显色法鲎试剂盒或动态浊度法鲎试剂(根据已有仪器定)。如果有动态比色法鲎试剂那就多一种选择(当然要看成本)。

相信通过以上介绍您对鲎试剂已经有一定了解,聪明的你一定知道如何去选择鲎试剂了吧!

 

 

特别说明:由于环境污染等原因,鲎的数量在不断减少。台湾澎湖海洋生物研究中心黄丁士副研究员正在做养殖鲎的研究,他培育出12000尾刚孵化的“一龄鲎”, 60天后有250尾脱壳成“二龄鲎”,仅有少部分“二龄鲎”再经历2周成为“三龄鲎”。“二龄鲎”到“三龄鲎”的阶段存活率只有5%,人工繁殖技术上一直未能突破“三龄鲎”的瓶頸而停滯。日本也曾经划出鲎保护区,专门用来进行人工养殖鲎,但经过多年实验以失败告终。鲎的产卵量很大,但是能活到成年的比例很小。一只鲎必需脱壳1516次,需要15年达到成年,只有成年鲎才可以采血,因此人工养殖鲎基本上不太可能。部分酒家所谓的人工养殖大多是将成年鲎圈养起来。部分保护动物是可以经营利用的,前提是,被经营利用的必须是这些野生动物经人工养殖繁殖的后代。 因此所有酒家经营的鲎都是非法的。目前日本等国由于鲎的数量减少不得不进口美洲鲎及中国鲎原料来生产鲎试剂。因此,请看到此文的朋友不要吃鲎,也请转告您身边的亲朋好友保护它。

 

 

厦门鲎试剂厂专业生产各种鲎试剂,已有凝胶法鲎试剂、特异性鲎试剂、动态浊度鲎试剂、显色基质鲎试剂盒、以及内毒素检测专用酶标仪、内毒素工作品、内毒素指示剂、无热原吸头盒,无热原试管,无热原空安瓿,无热原水,无热原微板,无热原加样槽,手动可调移液器,旋涡混合器,有机玻璃试管架等细菌内毒素检测系列产品。产品齐全,欢迎选购。

 

(来源: 厦门市鲎试剂实验厂有限公司


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