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HGVAb-IgG阳性是对HGV进行诊断的重要依据

厦门慧嘉生物科技有限公司2009年10月16日 9:50 点击:1243

庚型肝炎病毒检测

 

    庚型肝炎病毒(HGV)呈世界性分布,与人类急性和()慢性肝炎有关。主要以血液途径传播,如输血及血制品、静脉吸毒、使用污染的注射器、经常接触血源等。HGV为单股正链RNA病毒,基因组全长9 392个核苷酸。基因结构分为:5’非编码区、编码区(结构区和非结构区)3’非编码区,结构区编码核心蛋白和包膜蛋白,非结构区有NSlNS2NS3NS4NSs5个区,其中NS2编码蛋白酶。庚型肝炎病毒(HGV)实验室检测指标主要为HGVAb-IgG

    [测定方法

    [方法学原理庚型肝炎病毒(HGV)特异性抗原预包被于微孔板条上,样品加入已有样品稀释液的反应孔中,在随后的温育过程中,若样品中含特异性抗体(HGVAb—IgG),则该抗体与包被抗原形成抗原抗体复合物被吸附到微孔板上,再加入酶标记的第2抗体,最终形成抗原抗体酶标记第2抗体复合物,洗涤除去未结合的游离酶,加入显色剂后显色。反之,若样品中不含特异性抗体(HGVAb-IgG),则加入显色剂后不显色。

    [标本准备静脉抽血2ml,不抗凝。

    [试剂]

    1.包被反应板

    2.样品稀释液

    3.阴性对照

    4.阳性对照

    5.洗涤剂

    6.酶标记第2抗体

    7.显色剂AB

    8.终止液

    [仪器设备酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。

    [测定步骤]

    1.用加样器在微孔反应条中加入样品稀释液,每孔100ul

    2.将待测标本各l0ul分别加人已有样品稀释液的各孔中,直接加阴性对照、阳性对照各100u1,设空白对照1孔。

    3.充分混匀,37环境中温育20min

    4.倾去内容物,用洗涤液洗板5次,确保每次吸净无残留,全部洗完后在吸水纸上用力拍干。

    5.各孔加入酶标记第2抗体100fA,振荡混匀。

    6.倾去内容物,用洗涤液洗板5次,确保每次吸净无残留,全部洗完后在吸水纸上用力拍干。

    7.每孔加入显色剂AB1滴,显色10min

    8.终止显色后,在酶标仪上比色(波长为450nm),样品吸光度大于阴性对照21倍者为阳性。

    [注意事项]

    1.试剂盒从冷藏环境中取出时应置室温平衡30min后方可使用,未用完的微孔条用自封袋密封保存,温育酶标板的时间和温度必须严格控制。

    2.加液时必须用移液器,并经常校对移液器的准确性。

    3.洗涤时各孔均需加满洗涤液,防止孔内有游离酶不能洗净。使用洗板机洗涤应设定3060s浸泡时间。

    4.所有样品和废弃物都应按传染源处理,终止液为2molL的硫酸,使用时必须注意安全。

    5.操作过程中禁止将预包被微孔板与其他试剂、次氯酸类消毒剂接触。

    [正常参考值]  HGVAb-IgG阴性

    [临床意义]  HGVAb-IgG阳性是对HGV进行诊断的重要依据。HGVAb-IgG持续时间较长,具有流行病学调查意义。

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(来源: 厦门慧嘉生物科技有限公司


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