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单纯疱疹Ⅰ型抗体IgM(HSV-ⅠAb-IgM)检测

厦门慧嘉生物科技有限公司2009年10月11日 9:44 点击:1382

单纯疱疹型抗体IgM(HSV-Ab-IgM)检测

 

    [测定方法

    [方法学原理在微孔表面包被纯化的HSV抗原。被稀释过的患者血清加入微孔中。如存在HSV—I Ab-IgM可与微孔上抗原相结合。然后洗去未结合物质,再加入酶联液,与抗原抗体复合物结合。洗去过量的酶联液。最后加入底物和色原(显色液)。在特定时间终止酶联液的催化反应。所产生的颜色强度与标本中HSV—I Ab-IgM含量呈正相关。通过酶标仪与校正和对照相比,读出结果。

    [标本准备] 静脉抽血2ml,不抗凝。

    [试剂]

    1.微孔板

    2.样品稀释

    3HRP-抗人IgM酶结合物

    4.阴性对照

    5.阳性对照

    6.洗涤剂

    7TMB显色液

    8.终止液

    [仪器设备] 酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。

    [测定步骤]

    1.吸取10ul血清标本加入250ul标本稀释液中,做126稀释。

    2.吸取100ul稀释过的血清、阳性对照、阴性对照和校正液(不稀释),加入微孔板内,设空白对照1孔。振荡,混匀,去除孔内液体中气泡,室温环境中孵育20min

    3.弃去孔内液体,用洗涤液洗5次。

    4.每孔再加人100rd酶联结合物,室温环境中孵育20min

    5.弃去孔中酶联液,用洗涤液洗5次。

    6.每孔加入100~d TMB显色液,室温环境中孵育10min

    7.每孔加入100rtl终止液,终止反应,充分混匀。

    8.用酶标仪(波长为450nm)读取吸光度。以待测样本吸光度大于校正液孔吸光度为阳性。

    [注意事项]

    1.整个检测过程应符合实验室质量手册和生物安全守则规定,严防交叉污染。

    2.所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按传染物处理。

    3.试剂应保存于2—8C冰箱,使用前应在室温环境中平衡30min

    4.洗涤时各孔均应加满洗涤液,防止孔内有游离.酶未洗净,每次洗板后均应在吸水纸上拍干。

    5.血标本应分离出血清保存,28C可保存7d,冷冻保存可至6个月,避免反复冻融。

    6.试剂在储存或使用过程中,禁止过热、曝晒或强光。

    [正常参考值]  HSV—I Ab-IgM阴性

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(来源: 厦门慧嘉生物科技有限公司


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