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EB病毒抗体IgM(EBVAb-IgM)检测

厦门慧嘉生物科技有限公司2009年10月10日 8:42 点击:1899

EB病毒抗体IgM(EBVAb-IgM)检测

 

    EB病毒(epstein-barr virusEBV)属疱疹病毒科,有学者提出此病毒为第1个人类肿瘤病毒的候选者。EBV直径为90180nm,为20面体核衣壳,有162个衣壳体,含有1个蛋白核心和DNA分子,病毒基因组为线性双链DNA。原发性感染发生在幼儿时,多为隐性感染,此后终身带病毒;若原发感染发生在青春期后,则相当一部分为显性感染。EBV感染患者后可出现传染性单核细胞增多症、X—连锁淋巴增殖综合征,以及与EBV相关的恶性疾病如鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤等。

    [测定方法

    [方法学原理将纯化的EB病毒抗原预包被于微孔板上,加入稀释过的患者血清于相应微孔板中,若存在EBVAb-IgM则可与微孔板上包被抗原相结合。洗去未结合部分后,再加入酶联结合物,与抗原抗体复合物结合,在显色剂作用下发生显色反应,颜色强度与样本中EBVAb-IgM含量呈正相关。

    [标本准备]  静脉抽血2ml,不抗凝。

    [试剂]

    微孔板

    样品稀释液

    HRP-抗人IgM酶结合物

    阴性对照

    阳性对照

    洗涤剂

    TMB显色液

    终止液

    [仪器设备] 酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。

    [测定步骤]

    1.将待检血清编号,用样品稀释液作1100稀释。

    2.根据用量取出相应孔数的微孔板条,其余部分密封后4环境中保存。

    3.加人已稀释的待检血清、阴性对照,阳性对照各lOOgI至反应孔内,阴性对照、阳性对照设复孔,设空白对照1(空白孔不加任何试剂),振荡混匀,37环境中温育1h

    4.弃去孔中液体,用洗涤液洗涤5次,拍干。   

    5.每孔加入酶标记物lOOtA,混匀,37环境中水浴1h

    6.弃去孔中液体,用洗涤液洗涤5次,拍干。

    7.向每孔加入底物A液和底物B液各2滴,置室温环境中10min,每孔再加终止液50gl终止反应。

    8.以空白对照(只加蒸馏水200g1)校零,在波长450nm处读取各孔的OD值,凡样品孔OD大于或等于阴性对照孔2倍,该样品即为阳性。

    [正常参考值]  EBVAb-IgM阴性

    [注意事项]

    1.使用前试剂盒应预先在室温环境中平衡30min

    2.试剂盒在2—8避光保存,启用后应尽快用完。

    3.不同批次的试剂组分不能混用。

    4.实验后试剂、血清标本均应视为有传染性物质。

    5.用滴瓶滴加时,滴瓶应垂直,用力和速度应均匀;加样后,充分混匀。

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(来源: 厦门慧嘉生物科技有限公司


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